Bioethanol strains of Saccharomyces cerevisiae characterised by microsatellite and stress resistance

Abstract Strains of Saccharomyces cerevisiae may display characteristics that are typical of rough-type colonies, made up of cells clustered in pseudohyphal structures and comprised of daughter buds that do not separate from the mother cell post-mitosis. These strains are known to occur frequently in fermentation tanks with significant lower ethanol yield when compared to fermentations carried out by smooth strains of S. cerevisiae that are composed of dispersed cells. In an attempt to delineate genetic and phenotypic differences underlying the two phenotypes, this study analysed 10 microsatellite loci of 22 S. cerevisiae strains as well as stress resistance towards high concentrations of ethanol and glucose, low pH and cell sedimentation rates. The results obtained from the phenotypic tests by Principal-Component Analysis revealed that unlike the smooth colonies, the rough colonies of S. cerevisiae exhibit an enhanced resistance to stressful conditions resulting from the presence of excessive glucose and ethanol and high sedimentation rate. The microsatellite analysis was not successful to distinguish between the colony phenotypes as phenotypic assays. The relevant industrial strain PE-2 was observed in close genetic proximity to rough-colony although it does not display this colony morphology. A unique genetic pattern specific to a particular phenotype remains elusive.

Detection and quantification of Duffy antigen on bovine red blood cell membranes using a polyclonal antibody / Detecção e quantificação do antigeno Duffy nos eritrócitos de bovinos empregando um anticorpo policlonal

Babesiosis is one of the most important diseases affecting livestock agriculture worldwide. Animals from the subspecies Bos taurus indicus are more resistant to babesiosis than those from Bos taurus taurus. The genera Babesia and Plasmodium are Apicomplexa hemoparasites and share features such as invasion of red blood cells (RBC). The glycoprotein Duffy is the only human erythrocyte receptor for Pasmodium vivax and a mutation which abolishes expression of this glycoprotein on erythrocyte surfaces is responsible for making the majority of people originating from the indigenous populations of West Africa resistant to P. vivax. The current work detected and quantified the Duffy antigen on Bos taurus indicus and Bos taurus taurus erythrocyte surfaces using a polyclonal antibody in order to investigate if differences in susceptibility to Babesia are due to different levels of Duffy antigen expression on the RBCs of these animals, as is known to be the case in human beings for interactions of Plasmodium vivax-Duffy antigen. ELISA tests showed that the antibody that was raised against Duffy antigens detected the presence of Duffy antigen in both subspecies and that the amount of this antigen on those erythrocyte membranes was similar. These results indicate that the greater resistance of B. taurus indicus to babesiosis cannot be explained by the absence or lower expression of Duffy antigen on RBC surfaces.

As doenças infecciosas e parasitárias causam perdas importantes em vários setores da produção da pecuária mundial. Estima-se que mais de 600 milhões de bovinos de países tropicais e subtropicais estejam expostos à infecção por Babesia sp. gerando grande prejuízo econômico. Os gêneros Babesia e Plasmodium são hemoparasitas pertencentes ao filo Apicomplexa e apresentam características comuns no processo de invasão eritrocitária. A babesiose bovina causada por Babesia bigemina e Babesia bovis apresenta sinais clínicos similares a malária humana causada por Plasmodium vivax e Plasmodium falciparum. A glicoproteína Duffy é a única receptora para o P. vivax em humanos. A maioria dos indivíduos negros africanos é resistente a este parasita devido a uma mutação que provoca a ausência de expressão desta glicoproteína na superfície das hemácias. Tendo em vista este fato, e que animais da subespécie Bos taurus taurus são mais susceptíveis à babesiose quando comparados à animais Bos taurus indicus, objetivou-se neste trabalho a detecção e quantificação do antígeno Duffy na superfície dos eritrócitos de bovinos empregando para tal, anticorpo policlonal que permitisse investigar se as diferenças na susceptibilidade são devido a diferentes níveis de expressão do antígeno Duffy nas hemácias. Ensaios de ELISA mostraram que o anticorpo produzido foi capaz de reconhecer o antígeno Duffy presente nas hemácias bovinas e a análise quantitativa não demonstrou diferença significativa na presença do mesmo. Estes resultados sugerem que a resistência maior dos zebuínos à babesiose não se deve à ausência de expressão, ou à presença em menor quantidade do antígeno Duffy na superfície de suas hemácias.

Clonagem e expressão da região HEP do domínio de heparina da proteína hemaglutinina filamentosa (FHA) da bactéria Bordetella pertussis em sistemas heterólogos / Cloning and expression of HEP region of heparin domain of filamentous hemagglutinin protein (FHA) of Bordetella pertussis bacteria in heterologous systems

Bordetella pertussis, o agente etiológico da coqueluche ou tosse comprida, que estabelece a infecção através da fixação bacteriana no epitélio do rato respiratório superior. Os principais mediadores de adesão da bactéria são a toxina pertússica (PT) e a hemaglutinina filamentosa (FHA). A FHA é a adesina majoritária e contém pelo menos 4 domínios: porção N-terminal, domínio de reconhecimento de carboidratos (CRD) (`FHA IND. 1141-1279ï), trinca de aminoácidos Arginina-Glicina-Ácido aspártico (RGD) (`FHA IND. 1097-1099ï) e o sítio de ligação a heparina (domínio Hep) (`FHA IND. 442-863ï). Neste trabalho, foi realizado a amplificação de duas regiões do domínio de ligação à heparina, as regiões MAL80 (`FHA IND. 299-873ï) e HEP (`FHA IND. 430-873ï)...